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熒光顯微鏡

1.廣角目鏡2.消色差物鏡4.四孔物鏡轉換器4.下降熒光裝置藍色(B)綠色(G)勵磁系統(tǒng)100W水銀燈5.同軸粗調微動聚焦機構:聚焦范圍15 mm微動值0.002 mm 6.雙層機械工作臺縱向移動范圍:70 mm橫向移動范圍:50 mm(1)滑動玻璃滑塊厚度應介于0.8和1.2 mm之間,坡度過厚,一方面,光吸收更多,另一方面,激發(fā)光不能聚集在試樣上。

載玻片必須光滑,厚度均勻,無自發(fā)熒光。

有時使用石英玻璃載玻片。

(2)蓋玻片蓋玻片的厚度約為0.17mm,光滑潔凈。

為了增強激發(fā)光,還可以使用干涉覆蓋玻璃,這是一種特殊的覆蓋玻璃,在不同波長的光(如氟化鎂)上涂有幾層不同的干涉效應,可以產生熒光平滑。

通過并反射激發(fā)光,反射的激發(fā)光可以激發(fā)樣本。

(III)標本組織切片或其他標本不應太厚。

例如,太大的激發(fā)光主要在樣本的下部消耗,而由物鏡直接觀察的上部沒有被充分激發(fā)。

另外,細胞重疊或雜質掩蔽影響判斷。

(四)密封劑密封劑常用甘油,必須無自發(fā)熒光,無色透明,熒光亮度在pH 8.5~9.5時更亮,不易褪色。

因此,使用等量的甘油和0.5mol / l的pH為9.0至9.5的碳酸鹽緩沖液作為密封劑。

(5)鏡油通常,暗視野熒光顯微鏡和油鏡觀察樣品必須使用鏡油。

最好使用特殊的非熒光油,或使用上述甘油代替。

也可以使用液體石蠟,但折射率低。

對圖像質量有輕微影響。

熒光顯微鏡使用具有高發(fā)光效率的點光源來發(fā)射特定波長的光(例如紫外光3650或紫藍色4200)作為激發(fā)光,并且激發(fā)樣品中的熒光物質發(fā)出各種顏色。

熒光后,通過物鏡和目鏡的放大觀察。

這樣,在強烈的對比背景下,即使熒光非常弱,也易于識別并具有高靈敏度,主要用于細胞結構和功能以及化學成分的研究。

熒光顯微鏡的基本結構包括常見的光學顯微鏡和一些附件(例如熒光光源,激發(fā)濾光片,雙色分束器和阻擋濾光片)。

熒光光源 - 一般使用超高壓汞燈(50-200W),可以發(fā)出各種波長的光,但每種熒光物質都有一束激發(fā)光,產生最強的熒光,所以有必要增加激發(fā)濾光片(通常,有紫外線,紫色,藍色和綠色激發(fā)濾光片),只有一定波長的激發(fā)光透過被照射的樣品,其他光被吸收。

在用激發(fā)光照射每種物質后,它在非常短的時間內發(fā)射比照射波長更長的可見熒光。

熒光是特異性的并且通常比激發(fā)光弱。

為了觀察特定熒光,在物鏡后添加阻擋(或抑制)濾光器。

它有兩個功能:一個是吸收和阻擋激發(fā)光進入目鏡,以避免干擾熒光和損害眼睛,另一個是選擇并允許特定熒光通過,顯示特定的熒光顏色。

必須選擇兩個過濾器才能使用。

1.照射模式通常為噴霧型,即光源通過物鏡投射到樣品上; 2.光源為紫外光,波長較短,分辨率高于普通顯微鏡; 3.有兩個特殊的濾光片,在光源之前用于濾除可見光,目鏡和物鏡之間用于濾除紫外線以保護眼睛。

熒光顯微鏡也是一種光學顯微鏡。

主要區(qū)別在于兩者的激發(fā)波長不同。

這決定了熒光顯微鏡和普通光學顯微鏡的結構和使用方法之間的差異。

熒光顯微鏡是免疫熒光細胞化學的基本工具。

它由光源的主要部件,濾板系統(tǒng)和光學系統(tǒng)組成。

熒光被一定波長的光激發(fā),并通過物鏡和目鏡系統(tǒng)放大,以觀察樣品的熒光圖像。

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